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LB培养基的配制

2025-09-15 05:43:30

问题描述:

LB培养基的配制,真的撑不住了,求高手支招!

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2025-09-15 05:43:30

LB培养基的配制】在微生物实验中,LB培养基(Luria-Bertani medium)是一种广泛使用的基础培养基,特别适用于大肠杆菌等原核生物的培养。其成分简单、营养均衡,能够支持多种细菌的生长。本文将对LB培养基的配制方法进行总结,并以表格形式清晰展示所需材料和步骤。

一、LB培养基简介

LB培养基由三部分组成:胰蛋白胨(Tryptone)、酵母提取物(Yeast Extract)和氯化钠(NaCl)。其中,胰蛋白胨提供氮源和氨基酸,酵母提取物含有丰富的维生素和微量元素,而氯化钠则维持渗透压平衡。根据实验需求,还可添加琼脂制成固体培养基,或加入抗生素用于筛选转化菌株。

二、LB培养基的配制方法

以下是配制1升液体LB培养基的基本步骤:

步骤 内容
1 准备蒸馏水,量取1000 mL,放入烧杯中
2 加入10 g 胰蛋白胨(Tryptone)
3 加入5 g 酵母提取物(Yeast Extract)
4 加入10 g 氯化钠(NaCl)
5 搅拌至完全溶解
6 调节pH至7.0~7.2(可使用NaOH或HCl)
7 高压灭菌(121℃,15 psi,15分钟)
8 灭菌后冷却至适宜温度(约50℃)即可使用

如需制备固体LB培养基,可在上述步骤中加入15 g琼脂粉,按相同方式灭菌并倒入无菌培养皿中。

三、注意事项

- 所有器具需提前灭菌,避免杂菌污染。

- 配置完成后应尽快使用,避免长时间存放导致营养成分降解。

- 若需长期保存,可分装后冷冻保存,但建议在一周内使用完毕。

四、常见变体与用途

类型 成分 用途
LB液体培养基 胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl 常规细菌培养
LB固体培养基 添加琼脂 菌落分离、平板划线
LB + 抗生素 在基础LB中加入适当浓度抗生素 转化菌株筛选
LB + X-gal 加入X-gal溶液 蓝白筛选(如pUC质粒系统)

通过以上步骤和表格内容,可以快速掌握LB培养基的配制方法。实际操作时,可根据具体实验目的灵活调整配方,确保培养基的适用性和稳定性。

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